769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
| 英文名稱 | 293T [HEK-293T] | 規(guī)格 | 1×106cells |
| 種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 貨號(hào) | E2050 |
| 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
別稱769P; 769-p
凍存條件：凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）
生長培養(yǎng)基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培養(yǎng)條件:：氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例1:2-1:8
推薦換液頻率2-3次/周
背景描述769-P細(xì)胞來源于原發(fā)性透明細(xì)胞腺癌；769-P細(xì)胞呈邊界不清楚的球形、高核質(zhì)比、有微絨毛和橋粒；769-P細(xì)胞可以在軟瓊脂中生長。 年齡（性別）女性；63歲 組織來源器官：腎；疾病：腎透明細(xì)胞腺癌 細(xì)胞類型腫瘤細(xì)胞 腫瘤類型腎癌細(xì)胞 生物安全等級(jí)BSL-1 倍增時(shí)間~35 hours 致瘤性Yes, forms colonies in soft agar.Yes, forms tumors in immunosuppressed hamsters.Yes, forms tumors in nude mice. 保藏機(jī)構(gòu)ATCC; CRL-1933 |
1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| Hut-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 | lovo/Adr人結(jié)腸癌藥株 |
| HuTu-80人十二脂腸腺癌 | A2780/Adr人卵巢耐藥株 |
| JAR人胎盤絨毛癌細(xì)胞 | K562/Adr人白血耐藥株 |
| JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞 | HCT8/V人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株 |
| Jeko-1 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | HL-60/Adr人白血耐藥株 |
| jurkat人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 | A2780/V人卵巢癌長春新堿耐藥株 |
| KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞 | SGC7901/V人胃癌長春新堿耐藥 |
| KG-1急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞 | A549耐藥株人肺耐藥株 |
| LNCaP人前列腺癌細(xì)胞 | Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株 |
| MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞 | MCF7/Taxol人乳腺癌耐藥株 |
| MCF-7人乳腺癌細(xì)胞 | SMMC-7721/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株 |
| MEG-01人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | A549/TAXOL人肺癌耐藥株 |
| MOLT-4人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞 | K562/ADR人白血病耐藥株 |
| MS751人子宮頸表皮癌細(xì)胞 | A549/DDP人肺癌耐藥株 |
| NCI-H157人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 | SGC7901/DDP人胃癌耐藥株 |
| NCI-H226人肺鱗狀癌細(xì)胞 | SK-MES-1/DDP人肺鱗癌耐藥株 |
| NCI-H23人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | T-24/DDP人膀胱移行細(xì)胞癌耐細(xì)胞株 |
| NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 | 769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系HT-29/DDP人結(jié)直腸腺癌耐藥株 |
| NCI-H460人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | SMMC7721/DDP人肝癌耐藥株 |
| NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞 | A375/DDP人惡性黑色素瘤耐藥株 |
| OVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞 | CNE2/DDP人鼻咽癌耐藥株 |
| PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細(xì)胞 | Bxpc3/DDP人胰腺腫瘤耐藥株 |
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
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