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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>胚肺二倍體細胞;HEL-2
         
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        產品名稱:
        胚肺二倍體細胞;HEL-2
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          胚肺二倍體細胞;HEL-2的詳細資料:

        公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

        產品名稱

        生長特性

        貨號

        胚肺二倍體細胞;HEL-2

        貼壁生長

        EY-X63739

        細胞名稱  胚肺二倍體細胞;HEL-2
        形態特性: 成纖維細胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 該細胞系來源于一女性胚胎的肺組織。1986年中國科學院昆明細胞庫建立。

        培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

        傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

        傳代情況: P17

        凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 熒光法(-)
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        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養:
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        Luteolin 5,3'-dimethyl ether

        CAS No.:62346-14-9

        中文名:木犀草素-5,3'-二甲醚

        分子式:C17H14O6

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        GYPB/CD235b  血型糖蛋白δ抗體    現貨供應 0.2ml FTase Substrate, Fluorogenic

        FUT1  巖藻糖轉移酶1抗體    現貨供應 0.2ml Linaclotide

        ICAM4/CD242  細胞間粘附分子4抗體    現貨供應 0.2ml benzoylpaeoniflorin

        RHCG  RH血型C糖蛋白抗體    現貨供應 0.2ml 3,4,5Tricaffeoylquinic acid

        SLC14A1/RACH1  尿素轉運型糖蛋白抗體    現貨供應 0.2ml Alisol A 24acetate

        XKR1  膜轉運蛋白XK抗體    現貨供應 0.2ml Alisol C monoacetate

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        油丁酯  進口、國產  英文名稱:Butyloleate  含量:AR,98%

        鈾試劑III  進口、國產  英文名稱:ArsenazoIII  含量:BR,96%

        有機硅消泡劑  進口、國產  英文名稱:Siliconedefoamer  含量:AR,99%

        有水鐵  進口、國產  英文名稱:Ferrichydroxide  含量:2.7N,99.7%

        有效  進口、國產  英文名稱:Validamycin  含量:BR,豬腸胃

        莠去津  進口、國產  英文名稱:Atrazine  含量:超純,100mM

        右旋甘  進口、國產  英文名稱:LPhenylglycine  含量:BR,99%

        右旋泛  進口、國產  英文名稱:SodiumDpantothenate  含量:CP,97.5%

        右旋酒石  進口、國產  英文名稱:DTartaricacid  含量:AR,99.5%

        右旋脯甲酯氫物  進口、國產  英文名稱:DProlinemethylesterhydrochloride  含量:BR,98%
        胚肺二倍體細胞;HEL-2酵母浸出物葡萄糖瓊脂培養基規格:250g用途:用于乳和乳制品中酵母菌和霉菌的計數

        哥倫比亞血瓊脂基礎規格:BR250g用途:營養非常豐富,用于各種細菌的基礎培養基

        10%化鈉胰蛋白胨大豆肉湯規格:10ml*20支/包用途:用于金黃色葡萄球菌的MPN測定及增菌培養

        木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂規格:250g用途:用于藥品或生物制品中沙門氏菌選擇分離培養

        百里香酚蘭規格:25g用途:微生物指示劑

        緩沖蛋白胨水(BPW)規格:250g用途:用于配制腸球菌檢測用稀釋液
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
        ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產品相關關鍵字: 胚肺二倍體細胞 HEL-2
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        021-69985169
        13611928337,15021460884

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