實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

細(xì)胞名稱  恒河猴腎細(xì)胞；MMK2
形態(tài)特性: 上皮樣，多角形

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞來源于一雌性獼猴的腎組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法（-）
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Luteolin 5-methyl ether

CAS No.：58115-29-0

中文名：木犀草素-5-甲醚

分子式：C16H12O6

噻酰草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　趨因子C基元受體1(XCR1) 規(guī)格： 0.1g

硅唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　趨因子C基元配體2(XCL2) 規(guī)格： 0.1g

螺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　趨素(CHEM) 規(guī)格： 0.1g

芐呋;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　趨素(CHEM) 規(guī)格： 0.1g

基畏;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　超氧物歧酶(SOD) 規(guī)格： 0.1g

基阿維菌素;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品（ 訂購|咨詢 　超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 0.1g

京平（格泊素）對照品;有報告 訂購|咨詢 　超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 20mg

D水蘇糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 1g

鞣花;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 　超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 0.1g

基小檗 訂購|咨詢 　超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

6″O木糖苷 訂購|咨詢 　博來水解酶(BLMH) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

檸檬酯C 訂購|咨詢 　斯鈣素1(STC1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

巨大戟5,20縮3當(dāng)歸酯 訂購|咨詢 　斯鈣素1(STC1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

Dapagliflozin 訂購|咨詢 　斯鈣素2(STC2) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

長春 訂購|咨詢 　聯(lián)會復(fù)合體蛋白3(SYCP3) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

異丹葉大黃素 訂購|咨詢 　聯(lián)會蛋白(GMNN) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

訂購|咨詢 　葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

無水檸檬 訂購|咨詢 　葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI) 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg

GTSE1/G2 and S phase expressed 1  G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cytisine

HIPK4  同源相互作用蛋白激酶4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Irbesartan

AMBRA1  自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 5'O(4,4'Dimethoxytrityl)thymidine3'Osuccinic acid

IBRDC2/RNF144B  E3泛素蛋白連接酶144B抗體（環(huán)指蛋白144B）    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D(?)Salicin

JMY  連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D(?)Salicin

LRDD/PIDD  富含亮重復(fù)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnolol

MCG10  RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnolol

NME6/IPIA ALPHA  P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Esomeprazole magnesium trihydrate

銀  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Anthraquinonesulfonicacidsodiumsaltmonohydrate  含量:BR，99%

吲哚甲  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Indolecarboxaldehyde  含量:BR，強(qiáng)度1200

吲哚  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IUPAC  含量:USP級，95%

吲哚  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IAANa  含量:生物技術(shù)級，770ug/mg

吲哚鉀  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IPAK  含量:BR，1%

吲哚  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IPA  含量:高純，98%

吲哚丁鉀  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IBAK  含量:BR，780µg/mg

吲哚丁  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IUPAC  含量:BR，0.4%

吲哚酚β葡糖苷  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:IndoxylGlucoside  含量:BR

茚滿  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Indan  含量:AR，99.8%
恒河猴腎細(xì)胞；MMK2鐵細(xì)菌培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于鐵細(xì)菌的分離培養(yǎng)

Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格：250g用途：用于選擇性分離培養(yǎng)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）

YEP培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于膿桿菌的增菌培養(yǎng)

志賀氏菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格：1000ml用途：用于志賀氏菌顯色培養(yǎng)

Candida Elective 瓊脂規(guī)格：250g用途：用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測定

卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格：250g用途：用于分離培養(yǎng)，需添加50%卵黃乳液(Japan方法)