狗原代外周血白原代細(xì)胞

商品屬性：

形態(tài)：
培養(yǎng)基：狗外周血白細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代特征：可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)

細(xì)胞基本屬性：

種屬來(lái)源：狗

組織來(lái)源：外周血外周血

生長(zhǎng)特性：細(xì)胞為混合體系，大部分懸浮生長(zhǎng)，小量貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨，1周左右

運(yùn)輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應(yīng)限制：僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹：:白細(xì)胞(英文名:leukocyte，white blood cell，簡(jiǎn)稱(chēng):WBC)，舊稱(chēng)白血球。血液中的一類(lèi)細(xì)胞。白細(xì)胞經(jīng)復(fù)合染料染色后，可根據(jù)其形態(tài)差異和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)的顆粒可分粒細(xì)胞和無(wú)粒細(xì)胞。無(wú)粒細(xì)胞又分為單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞兩種。血液中有三種類(lèi)型的淋巴細(xì)胞：B細(xì)胞、T細(xì)胞和NK細(xì)胞。粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有嗜色顆粒，分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到，血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少。具有細(xì)胞核。白細(xì)胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機(jī)體損傷治愈、抗御病原的入侵和對(duì)疾病的免疫方面有重要作用。

原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括：

?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動(dòng)物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時(shí)間短，冷消化時(shí)間長(zhǎng)但條件更溫和。

?四、吹打分散后，過(guò)濾、計(jì)數(shù)?：將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中，然后過(guò)濾、計(jì)數(shù)。

五、?按30萬(wàn)/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬(wàn)/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)

傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿

傳代方法：

1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4.待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

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