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        產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)
         
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        產(chǎn)品名稱:
        晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)
        產(chǎn)品型號:
        產(chǎn)品報價:
        產(chǎn)品特點:
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          晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)的詳細資料:

        公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

        產(chǎn)品名稱

        生長特性

        貨號

        晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)

        貼壁生長

        EY-X63361

        細胞名稱  晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)
        形態(tài)特性: 上皮樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性:

        培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS

        傳代方法: 1:3傳代;3~4天1次。

        傳代情況:

        凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
        ?
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養(yǎng):
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
        5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

        (Adenomatous polyposis coli protein) ELISA Kit
        小鼠雜交瘤;c7b8c3拉丁屬名: Issatchenkia orientalis2-氨基-6-氯苯甲酸Human SLC45A2 ELISA Kit
        小鼠雜交瘤;c7b8b5拉丁屬名: Bacillus  pumilus2-氨基-6-氯苯甲酸Human SLC47A1 ELISA Kit
        大鼠肝;BRL用途: 屬外生菌根菌2-溴-1,3,5-三異基苯Human SLC25A18 ELISA Kit
        大鼠腎系膜;RMC注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-溴-1,3,5-三異基苯Human SLC34A2 ELISA Kit
        正常大鼠腎(EGF受體陽性);NRK49F拉丁屬名: Aspergillus niger2,3-二氟苯甲Human SLC25A15 ELISA Kit
        大鼠胰島β瘤;RIN-m5F拉丁屬名: Mannheimia haemolytica2,3-二氟苯甲Human SLC25A22 ELISA Kit
        大鼠胰島瘤;INS-1注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 17-戊酸酯Human SLC25A2 ELISA Kit
        Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiaeMianserin HClHuman SLC22A18AS ELISA Kit
        大鼠骨髓瘤;IR983F拉丁屬名: Pseudallescheria boydiiMianserin HClHuman SLC22A18 ELISA Kit
        大鼠嗜堿性粒性白血病;RBL-2H3注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用Mianserin HClHuman SLC25A23 ELISA Kit
        大鼠癌;SHZ-88拉丁屬名: Schizophyllum commune硫化銀Human SLC22A23 ELISA Kit
        大鼠肝癌;RH-35注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用硫化銀Human SLC25A10 ELISA Kit
        大鼠肝癌;CBRH-7919 [CBRH7919]拉丁屬名: Alternaria alternata (Fries) Keissler3,5-二甲基-4-甲氧基苯甲酸Human SLC24A6 ELISA Kit
        大鼠腦膠質(zhì)瘤;C6拉丁屬名: Aspergillus candidusN,N-二甲基烯基Human SLC24A4 ELISA Kit
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        大鼠骨髓瘤;Y3-Ag 1.2.3注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用4-己基苯甲酸Human SLC27A2 ELISA Kit
        大鼠腎上腺嗜鉻瘤(高分化);PC-12(高分化)拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae4-甲苯三氟酸Human SLC25A46 ELISA Kit
        大鼠腎上腺嗜鉻瘤(低分化);PC-12(低分化)注意事項: 僅

        晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒GP-ⅣELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒GP-BBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        裸鼠蛋白磷酶(PP)ELISA試劑盒GP-BBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒GP-BBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒GPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒GPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒GPIELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        蛇因子(CVF)ELISA試劑盒GPIELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
        ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 晶體上皮 細胞永生系 SRA01/04(HLE)
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