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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>小鼠腫瘤細胞;B82
         
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        產品名稱:
        小鼠腫瘤細胞;B82
        產品型號:
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        產品特點:
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          小鼠腫瘤細胞;B82的詳細資料:

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        產品名稱

        小鼠腫瘤細胞;B82

        生長特性

        貼壁生長

        貨號

        EY-X63603

        細胞名稱  小鼠腫瘤細胞;B82
        形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: B82細胞是L929細胞系通過在BUdR中逐漸選擇所獲得的衍生株。具有70-80%的形成能力,可用于染色體分析和遺傳雜交研究。

        培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

        傳代情況: C7

        凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
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        產品特點:
        1、 使用方便:不需昂貴設備。
        2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
        3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
        4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
        5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
        6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
        7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
        8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
        培養(yǎng)操作步驟
        1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
        2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
        3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
        4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
        5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        操作流程:
        1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
        1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
        1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
        1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
        1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
        1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
        1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
        1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-Cas9-760 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Trametes rigida Montagne et Berkeley, teleo ..細胞名稱: 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-mCas9-761 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Antrodia sinuosa (Fries : Fries) Karsten細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-Cas9-755 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;400ug/mlG418

        Neurospora crassa Shear et Dodge細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-Cas9-759 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Plasmodium cynomolgi Mayer細胞名稱: 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-mCas9-762 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-mCas9-763 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-mCas9-764 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-766 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;400ug/mlG418

        Actinomyces gerencseriae Johnson et al.細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-768 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;400ug/mlG418

        Homo sapiens, human細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-767 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;400ug/mlG418

        freeze-dried細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-769 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;400ug/mlG418

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-771 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Pantoea agglomerans (Beijerinck) Gavini et ..細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-773 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Homo sapiens, human細胞名稱: 突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞;Li-7-mCas9-765 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        dried細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-772 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

        Rhizopus oryzae Went et Prinsen Geerligs, t ..細胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達的人膽囊癌細胞;GBC-SD-Cas9-774 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin
        小鼠腫瘤細胞;B82人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒VB12ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        人內皮抑素(ES)ELISA試劑盒VB12ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        M(IgM)ELISA試劑盒VB12ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        G(IgG)ELISA試劑盒VB6ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        A(IgA)ELISA試劑盒VB6ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        人可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒VB6ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        人可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒VB6ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

        人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒VCAM-1ELISAkit產品規(guī)格:48T/96T。

        產品相關關鍵字: 小鼠腫瘤細胞 B82
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