ELISA的基本原理有三條：

　　（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；

　　（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；

　　（3）酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物，它可以催化底物分子發生反應，產生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。

　　從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價雌二醇elisa 試劑盒：

　　1、靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。

　　2、特異性：常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應，使測定結果升高，可能導致假陽性，所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。

　　3、精密度：一般指其批內CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。

　　4、準確度：通過添加回收實驗進行評價。